Hepcidin Là Gì

  -  
Trục Hepcidin / Ferroportin điều chỉnh sự tăng sinc của các tế bào cơ suôn sẻ động mạch phổiTháng Hai 2021
*

Đối tượng

Tim mạchBệnh mạch máu

trừu tượng

Các phân tích đã làm được triển khai để đánh giá bất kỳ vai trò như thế nào so với trục hepcidin / ferroportin trong những bội nghịch ứng tăng sinh của những tế bào cơ trơn tuột hễ mạch phổi của con tín đồ (hPASMCs). Những vạc hiện hoàn toàn mới mẻ và lạ mắt đã chứng minh sự hiện diện của ferroportin vào hPASMC. Điều trị Hepcidin gây nên sự tăng sinch của các tế bào này rất có thể bằng phương pháp link với ferroportin dẫn mang đến nội hóa và giữ lại sắt của tế bào. Hàm lượng sắt vào tế bào tăng lên khi điều trị hepcidin. Ổn định biểu thị cùng buổi giao lưu của ferroportin trải qua can thiệp với kháng thể solo loại điều trị LY2928057 đảo ngược sự tăng sinch và tích trữ Fe của tế bào. Bên cạnh đó, chữa bệnh IL-6 đã có tìm kiếm thấy nhằm tăng cường sự tăng sinc cùng tích trữ sắt vào hPASMC; can thiệp với LY2928057 đã ngăn chặn phản ứng này. IL-6 cũng đã được tra cứu thấy để tăng phiên mã hepcidin và giải pđợi từ bỏ hPASMC cho thấy phản nghịch ứng tự động ẩn chứa. Tích lũy sắt qua trung gian Hepcidin hoặc IL-6 góp phần tăng sinc trong hPASMC; ferroportin qua trung gian bài trừ sắt tế bào giảm bớt sự tăng sinc. Huyết sắc đẹp tố cũng gây ra sự tăng sinch của hPASMC; trong những phân phát hiện nay mới khác, CD163, thú thể hemoglobin / haptoglobin, đã có kiếm tìm thấy bên trên những tế bào này với cung cấp một phương tiện cho sự hấp thụ sắt của tế bào thông qua hemoglobin. Il-6 cũng rất được tìm kiếm thấy nhằm điều chỉnh CD163 bên trên những tế bào này. Những tài liệu này đóng góp thêm phần hiểu rõ hơn về bài toán làm nuốm như thế nào sự phá đổ vỡ cân bằng nội môi Fe rất có thể gây ra sự tái chế tạo ra mạch máu, ví dụ như vào tăng áp suất máu đụng mạch phổi.

Bạn đang xem: Hepcidin là gì


quý khách đã xem: Hepcidin là gì

Giới thiệu

Hepcidin là một trong hooc môn peptide nhỏ dại (25 axit amin) chịu đựng trách rưới nhiệm chính vào vấn đề điều hòa thăng bằng nội môi sắt 1 . Đầu tiên được xác định trong nước tiểu, hepcidin chủ yếu được chế tạo bởi tế bào gan 2 cùng Khi được chuyển vào lưu lại thông hoàn toàn có thể cửa hàng với chất xuất khẩu sắt tế bào chuyển động ferroportin, khiến cho nó bị nội tiết, do đó ngăn ngừa sự thoát ra của Fe cùng khuyến khích duy trì Fe của tế bào 3 . Bây Giờ hepcidin cùng ferroportin đại diện thay mặt cho những cơ sở thống trị độc nhất vô nhị được nghe biết về xuất khẩu Fe tế bào. Ferroportin được trình bày chủ yếu trong những tế bào liên quan tới sự hấp phụ sắt (trường đoản cú cơ chế ăn uống uống) với cân đối nội môi; ví dụ bao gồm tế bào ruột non, đại thực bào với tế bào gan.

Biểu hiện nay Hepcidin được kiểm soát và điều chỉnh vì chưng nồng độ với shop sắt vào ngày tiết tương; sự kiểm soát phiên mã này được tạo nên điều kiện vì trúc thể protein hình hài xương (BMPR) kết phù hợp với tuyến phố truyền tín hiệu SMAD 4 . Điều đặc trưng, nhiễm trùng với viêm cũng điều chỉnh quy trình tổng phù hợp hepcidin, một bội phản ứng đáng chú ý độc nhất liên quan mang đến hoạt hóa IL-6 của con đường JAK / STAT 5 . Kết trái hạ đường ngày tiết, được bộc lộ là thiếu máu vì viêm, giúp tinh giảm độc lực vi sinh thứ (chú ý trong 6 ). Hậu quả tương quan đến sự việc tăng lưu trữ Fe hoàn toàn có thể bao gồm thiếu hụt hồng huyết cầu với xôn xao tác dụng tế bào tương quan mang lại tích trữ sắt dư vượt 7, 8 . Về vụ việc này, Fe cũng là 1 trong trải đời thiết yếu cho việc tăng sinch tế bào; Khi có sẵn vượt quá, một tâm lý tăng sinch được khuyến nghị 1, 7, 9 . Nhận thức bây chừ cho thấy rằng phần đông những loại tế bào biểu thị hết sức ít hoặc không có ferroportin vì chưng sắt chỉ được áp dụng cho những đòi hỏi điều đình chất với do đó không cần thiết phải xuất tài nguyên ổn này. Tuy nhiên, những nghiên cứu bắt đầu vẫn nổi lên chỉ ra rằng biểu hiện và hoặc mức sử dụng của ferroportin và hepcidin tương quan đến sự giữ giàng Fe trong những tế bào ở trong những một số loại ung thư khác nhau 10, 11, 12 cùng với bài toán duy trì sắt bao gồm liên quan đến sự sống cùng tăng sinch của tế bào, vì thế cho biết thêm khoảng đặc biệt của trục này vào bệnh tăng sinc.


Tăng huyết áp rượu cồn mạch phổi (PAH) là 1 trong quá trình căn bệnh trong số đó thăng bằng nội môi Fe không bình thường cũng sẽ được tương quan mang đến 13 cùng dư quá hepcidin đang chứng minh 8 . Nó được đặc trưng bởi sự tăng sản khu vực của các nguyên tố cơ trơn và tế bào nội tế bào của sức khỏe, các tiểu hễ mạch phổi tiền mao quản. Được nghe biết nhỏng một căn dịch thảng hoặc gặp gỡ, PAH được phân một số loại thành vô căn uống, di truyền hoặc các dạng dẫn mang lại kết phù hợp với những chứng trạng rõ ràng, chẳng hạn như mô liên kết hoặc bệnh tim bẩm sinh 14 . Đột đổi thay ren, cùng nhất là phần lớn bỗng nhiên biến hóa tương quan mang lại BMtruyền bá II sẽ nhấn mạnh hầu hết những ngôi trường hợp di truyền và một Xác Suất đáng kể những ngôi trường vừa lòng riêng lẻ của PAH 15 vô căn uống. Viêm rất có thể là mọt contact thịnh hành thân tín hiệu BMP. bị xôn xao cùng mất sắt; đặc biệt là IL-6 máu tương được nuôi sống người bệnh mắc PAH 16 . Một cách lôi kéo, tăng tài năng tự trị qua trung gian bởi hành vi lysosomal (trong các số đó BMPR-II với ferroportin hầu như bị thoái hóa) đã có được ghi dấn trong PAH 17, cho biết côn trùng liên hệ với Việc cách xử lý Fe vẫn chuyển đổi.

Xem thêm: Chiến Lược Phân Phối Là Gì? Các Chiến Lược Phân Phối Sản Phẩm


Đối với mối cung cấp sắt cho sự hấp thụ của tế bào, điều đó cực kỳ rất có thể sẽ tiến hành hỗ trợ trải qua các hình thức qua trung gian thụ thể transferrin-1. Tuy nhiên, sự thừa nhận tăng thêm rằng hemoglobin thoải mái bao gồm liên quan mang đến PAH 18, không có thứ hạng hình bệnh dịch rã máu cổ xưa, có thể nhắc nhở những tuyến phố bổ sung cập nhật để thu thừa nhận sắt do các tế bào mạch máu phổi.

Do đó, nghiên cứu và phân tích này đã có được thực hiện để reviews liệu gồm ngẫu nhiên phương châm làm sao so với trục hepcidin / ferroportin trong những phản nghịch ứng tăng sinch của các tế bào cơ trơn tru đụng mạch phổi. Mục tiêu của phân tích là bố lần. Đầu tiên, nhằm biểu lộ lần thứ nhất sự hiện diện của protein xuất khẩu sắt, ferroportin trong những tế bào này. Thđọng nhì, để kiểm soát và điều chỉnh biểu thị / hoạt động vui chơi của ferroportin trong những tế bào này nhằm nhận xét mọi tác động tiếp sau đối với những bội nghịch ứng tăng sinh. Thđọng tía, để Review bất kỳ sứ mệnh như thế nào đối với hemoglobin tự do thoải mái trong sự tăng sinch cùng những hình thức tiềm năng cho việc hấp phụ của tế bào. Những nghiên cứu và phân tích này rất có thể hỗ trợ ánh nhìn sâu sắc về sứ mệnh tiềm năng của cân bằng nội môi Fe bị phá đổ vỡ vào Việc tôn tạo mạch máu, nhỏng quan gần kề trong PAH.


Các kết quả

Ferroportin được biểu đạt bằng hPASMC cùng được cân bằng vày hepcidin

Ferroportin mRNA và biểu hiện protein được miêu tả trong những tế bào cơ trơn tru rượu cồn mạch phổi của nhỏ người (hPASMCs) (Hình 1). Biểu hiện mRNA cơ bản ferroportin đã có được phát hiện tại trong số hPASMC kiểm soát và điều hành. Điều trị hPASMC bởi hepcidin (1 Phag / ml) vào 2, 5 giờ không có ảnh hưởng đáng nói tới mức độ biểu lộ mRNA (Hình 1A). Phân tích Western blot lysates trường đoản cú những hPASMC kiểm soát và điều hành cho biết thêm một dải xê dịch 50 kD khớp ứng cùng với ferroportin lúc đối chiếu cùng với những lysate ruột bạn tiêu chuẩn (Hình 1 B). Một ELISA có độ nhạy cao đã làm được sử dụng để định lượng độ đậm đặc ferroportin. Nồng độ protein ferroportin cơ phiên bản vẫn giảm rõ rệt 24 tiếng sau khi điều trị bởi hepcidin, cho biết hình thức kiểm soát và điều hành điều hòa sau dịch mã (Hình 1C). hơn nữa, hóa tế bào miễn dịch theo sau bằng kính hiển vi đồng tiêu sẽ chứng tỏ sự xác định bề mặt tế bào tương tự như sự phân bổ nội bào của ferroportin trong các tế bào chưa được kích mê say (Hình 1 D, tnóng trên). Điều trị Hepcidin gây nên sự chuyển đổi trong phân phối ferroportin khỏi mặt phẳng tế bào, hướng tới nội địa hóa tất cả vệt lấm chấm, gợi nhắc về sự hình thành nhọt nước (Hình 1 D, tấm dưới). Kích thước của những phòng ban tất cả dấu này biến đổi từ bỏ 0, 51111M, tương xứng cùng với kích thước của lysosome, cho biết một vị trí tiềm năng cho sự xơ hóa của ferroportin nội bào. Liên quan đến những phân phát hiện này, trong những phân tích thuở đầu thực hiện những mẫu mã phổi từ bỏ các quy mô loài chuột của PAH (monocotaline cùng sugen hypoxia), mức độ nhuộm ferroportin khuếch tán cực kỳ phải chăng đã làm được bắt gặp trong các tế bào cơ trơn tuột, mà hơn nữa còn tồn tại một vài ba tế bào nhuộm khỏe mạnh trong mẫu moncrotaline, các kĩ năng là bạch cầu đối chọi nhân. Ngoài vấn đề chỉ ra một vài sự hiện hữu của ferroportin trong các tế bào có liên quan này, cần yếu phân tích và lý giải thêm đông đảo phát hiện này. Tuy nhiên, về vấn đề này đang có sự sút rõ rệt về nhuộm ferroportin ở sugen hypoxia lách (kiểm soát điều hành dương tính) Khi so sánh cùng với lách điều hành và kiểm soát, gợi nhắc về bội phản ứng hepcidin toàn cầu vào quy mô PAH này, xem tài liệu bổ sung.

Xem thêm: Download Bản Đồ Quy Hoạch Khu Đô Thị Thanh Hà Cienco 5 Hà Đông


*

Ferroportin được diễn tả bằng hPASMC cùng được ổn định vị hepcidin. Các hPASMC phối hợp được ( A ) được cách xử lý mang hoặc được giải pháp xử lý bằng 1 gang / mL hepcidin vào 2, 5 giờ với tổng số RNA được triết xuất bằng bộ RNeasy, cDNA được tổng thích hợp bằng phương pháp áp dụng mồi oligo-dT và RT-PCR được thực hiện bằng cách áp dụng màu xanh lá cây FBR mồi và-actin là ren giữ đơn vị. Các quý giá được liên tiếp chuẩn hóa lúc những lần biến hóa so với những ô ko được điều khiển và tinh chỉnh tại thời khắc 0. N = 4 ( B ) được xử trí trả vào 24 giờ, các tế bào được ly giải và tổng thể protein được tinh chiết, định lượng bởi xét nghiệm của Warren với 40 proteing protein được phân tách bên trên 10% SDS-PAGE và được đưa vào màng nitrocelluđại bại. Phương thơm pháp làm mờ phương Tây đã được tiến hành bằng phương pháp áp dụng IgG phòng thỏ làm cho IgG thiết yếu cùng dê kháng loài chuột kết phù hợp với peroxidase củ cải ngựa làm phòng thể đồ vật cung cấp. Lysates đường ruột của bé tín đồ (Abcam) đã có được thực hiện như là kiểm soát điều hành tích cực. N = 3 ( C ) hoặc được cách xử lý trả hoặc được khám chữa bằng 1 gang / mL hepcidin trong 24 giờ, những tế bào bị ly giải và toàn bô protein được chiết xuất. Biểu hiện nay Fpn đã có định lượng bằng phương pháp thực hiện bộ ELISA (BlueGene Biotech) cùng được chuẩn trở thành tổng protein được ước tính do dung dịch thử Bradford. N = 4 ( D ) Tấm hình đồng hóa của hPASMC được tdragon bằng (tnóng bên trên cùng) hoặc (tnóng dưới cùng) được giải pháp xử lý bởi 1 gang / mL hepcidin vào 20 Hay22 h và nhuộm miễn dịch cùng với kháng thể chống Fpn của thỏ cùng phòng thỏ Kháng thể lắp thêm cấp cho IgG được lắp thẻ Alexa-568. Các tế bào liên tục được hạn chế lại với DAPI cùng hình ảnh được chụp bởi kính hiển vi đồng tiêu Leica LSM 510. Thanh khô Phần Trăm = 10 đỉnh; N = 5. Bài kiểm soát t của sinh viên đã được thực hiện; ** p 5 với vì thế, thăng bằng nội môi Fe. Điều trị IL-6 của hPASMC sẽ minh chứng cụ thể rằng cả mRNA và bài trừ protein của hepcidin hầu hết tăng đáng kể theo qui định sau 2 giờ cùng 24 giờ (Hình 2A, B). Được xác định là biến hóa lần so với gen-actin, bộc lộ hepcidin tăng 3, 3 lần cùng với 10 ng / ml IL-6. Ngược lại, 48 giờ sau khoản thời gian điều trị IL-6, protein ferroportin đang bớt đáng chú ý 48% so với mức giá trị đối triệu chứng (p


*

IL-6 tăng biểu lộ hepcidin cùng ferroportin được điều chỉnh xuống trong hPASMC. Các hPASMC phối hợp được giải pháp xử lý mang hoặc cách xử lý bởi 10 ng / mL IL-6 ( A ) vào 2, 5 giờ đồng hồ với tổng RNA được chiết xuất bằng bộ RNeasy, cDNA được tổng vừa lòng bằng cách áp dụng mồi oligo-dT cùng RT-PCR được tiến hành bằng cách thực hiện màu xanh da trời lá cây của SYBR Hamp-1) mồi và-actin là gen giữ lại công ty. Các giá trị được liên tiếp chuẩn hóa khi những lần thay đổi đối với các ô không được điều khiển trên thời gian 0. N = 4 ( B ) trong 24 giờ, chất khôn cùng thanh lọc truyền thông được thu thập cùng bài trừ hepcidin được định lượng bằng bộ ELISA (Hệ thống R & D). N = 4 ( C ) vào 24 giờ đồng hồ tế bào bị ly giải với toàn bô protein được triết xuất. Biểu hiện Ferroportin đã có định lượng bằng phương pháp thực hiện cỗ ELISA (BlueGene Biotech) với được chuẩn trở thành tổng protein dự tính bởi thuốc thử của Bradford. N = 4 ( D ) Tấm hình đồng hóa của hPASMC được tdragon bởi (bảng bên trên cùng) hoặc (bảng dưới) được cách xử lý cùng với 10 ng / mL IL-6 trong đôi mươi Hay22 h với nhuộm miễn kháng cùng với phòng thể phòng Fpn của thỏ và chống dê Kháng thể thiết bị cung cấp IgG được thêm thẻ Alexa-568. Các tế bào tiếp tục được hạn chế lại với DAPI cùng hình hình ảnh được chụp bởi kính hiển vi đồng tiêu Leica LSM 510. Tkhô cứng phần trăm = 10 Pha, N = 5. Bài khám nghiệm của sinch viên đã có thực hiện; ** p


*

Hepcidin với IL-6 kích yêu thích tăng sinch hPASMCs bị khắc chế do LY2928057. hPASMC được mạ lên 96 tấm giếng (2500 tế bào / giếng). Sau Lúc tuân hành lúc đầu, những tế bào đã biết thành quăng quật đói vào máu tkhô hanh trong đôi mươi phút 24 giờ trước khi khám chữa trước bởi một mình hoặc ( A ) 1 mậtg / mL hepcidin hoặc ( B ) 10 ng / mL IL-6 trong 24 giờ. Sau đó, những tế bào được xúc tiếp với 1 μg / mL LY2928057 hoặc môi trường 1 mình trong 1, 5 tiếng sau đó liên tục thách thức lặp lại với hepcidin hoặc IL-6 sinh hoạt nồng độ hướng đẫn (hoặc chỉ sử dụng phương tiện đi lại truyền thông) vào 24 tiếng. BrdU đã được trình làng (ngơi nghỉ nồng độ lời khuyên ở trong phòng sản xuất) trong 24 giờ nữa trước khi thu hoạch các tấm. Sự tăng sinch được định lượng bởi bộ ELISA của BrdU bởi kháng thể kháng BrdU-POD. Tất cả các cách thức chữa bệnh đã được triển khai vào ba lần. Tất cả các bài xích phát âm đã có chuẩn hóa nhằm điều hành và kiểm soát những tế bào ko được điều trị. Dữ liệu hiển thị là ± SEM. N = 4. ANOVA theo sau là bài kiểm tra hậu hoc Bonferroni đã có được thực hiện; * p đôi mươi . Do kia, những thử nghiệm đã có được triển khai nhằm xác minh xem liệu chữa bệnh hepcidin cùng / hoặc IL-6 có lợi đến câu hỏi giữ lại Fe vào hPASMC và thiết bị nhì là nếu bình ổn thể hiện ferroportin cùng với LY2928057 hoàn toàn có thể tinh giảm sự tích lũy kia. Bằng phương pháp áp dụng xét nghiệm sắt color, đo tổng lượng sắt (Fe 3+ cùng sắt 2+ ), không có sự gia tăng đáng chú ý về sắt trong những tế bào được chữa bệnh bởi hepcidin hoặc IL-6 trong 24 giờ (Hình 4A, bảng mặt trái). Tuy nhiên, việc ủ trước với LY2928057 dẫn đến giảm đáng kể độ đậm đặc sắt trong tế bào: 5, 3 lần so với hepcidin cùng gấp 4, 16 so với IL-6 so với 2, 14 so với những tế bào không được chữa bệnh (Hình 4A, bảng mặt phải). Điều thú vị là, tiến hành những phnghiền đo giống như trong 48 tiếng cho biết các chất sắt vào tế bào tăng đáng kể: cấp 1, 88 lần với 2, 72 lần đối với các tế bào được chữa bệnh bởi hepcidin cùng IL-6 (Hình 4B, bảng bên trái) mặc dù lượng Fe tế bào rất có thể đo được bớt quá giới hạn phép đo xét nghiệm trong những tế bào được xử lý trước LY2928057 (Hình 4B, bảng bên phải). Để hỗ trợ thêm, mức độ Protein cân bằng sắt 2 (IREB2), chất sửa chữa thay thế mang đến cường độ sắt, đang sút trong các tế bào được khám chữa bởi hepcidin hoặc IL-6 và đáng kể so với những tế bào được chữa bệnh bằng hepcidin (Hình 4).